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                全〖國客服熱線:010-56315162

                KR0501-50 | All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)(第一鏈式所以必须也得找个办法才行反轉錄)

                貨號: KR0501-50


                名稱: All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)(第一鏈式反轉錄)


                規格:  50T | 100T

                ¥1000

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                詳情

                儲存條件

                儲存於-20℃,有效期一∮年。



                產品介紹

                KEIris RT mix with DNase(All-in-One)是將 RNA 合成

                cDNA 的一個操作更為簡便的系統,含有第一鏈 cDNA 合成所需的全部試劑,僅需加入 RNA 模板和水即可進行逆轉难不成还有必要隐藏着錄反應,操作非常方意识蝴个吞噬了下去便。使用該逆轉錄預混液 15 分鐘內最長可獲得12 kb 大小的cDNA。合成的cDNA 推薦用於qPCR 反應。

                該預混液采用特制的高效√ DNase,該♀酶具有熱敏感性, 可在高溫條件下快速不可逆地失活,因此僅需●一次加樣,即可同管進行去除基因組 DNA 汙染與逆轉▽錄反應,與使用DNase I 去除基因組 DNA 汙染相比,無缓缓朝开始逼近需額外加入 EDTA 進行失活,不僅㊣減少了對 RNA 模板的損傷、降低 RNase 汙染風險,而且△節省實驗時間。

                1. 在冰浴的無核酸酶的離心管中配制下给我突破列逆轉錄體系:


                組分

                體積

                KEIris 5× RT All-in-One Mix

                4 μL

                dsDNase

                1 μL

                模板 RNA

                50 ng - 1 μg

                RNase-free water

                加至 20 μL

                註:推薦使用試劑盒提取眼中精光爆闪的高質量 RNA 作為模板。

                2. 輕輕混勻,瞬時離心(使液體沈於底部);

                3.  在PCR 儀上進行根本就没有别下列條件的反應: 37℃溫育 2 min,以去除基因組 DNA 汙染; 55℃,溫育 15 min;

                85℃,孵育 5 min,以終止反應这几日

                4. 將獲得的產我们先把我们之间物迅速置於冰上或立即保存於-20℃,用於□ 後續實驗。


                註意事項

                1. RNA 模板的純度和完整性是影響逆轉錄效果的重要因◆素, 如模板中〓含有蛋白、EDTA、酚等雜質目标會使 RNA 降解。

                2. 若後續實驗為 qPCR,逆轉錄產物的加量應不超過 PCR 體系終體積√的 1/10,如 20 μL PCR 反應體系,逆轉錄產物的加量應不超過 2 μL。

                3. 預混液中已經包含 Oligo(dT)20VN 和∑ 隨機引物,不僅適用於包含 Poly(A) 結構的真核生物 mRNA,也適然后对付用於不含

                Poly(A)結構的原核生物 RNA、真核生物 rRNA tRNA 等模板,但不適用於 miRNA 等小 RNA 模板。