儀器與材料
2.1 材料
超純水,電阻率≥18MΩ.cm;乙***,色譜純試劑;甲醇,色譜純試劑;甲酸,
色譜純試劑;Waters 固相萃取小柱。

2.2檢測指標種√類


2.3 儀器
分析天平;超聲波清洗器;0.45μm 微膜過濾器;震蕩混勻★器;超高效液相
色譜
-
三重四極桿串聯質︻譜儀(AB 公司 QTrap6500)。
3 實驗方法
3.1 標準∑溶液的配制
標準儲備●液
a.
分別稱取標準物△質各 2.5 mg 於 25 mL 棕色容量瓶中,用甲醇稀釋定容,
配制成濃度約為 100 μg/mL 的單
標準儲備我在這液。
標準儲備液在
20℃避光條件@下可儲存
個月。
工作標準液
b.
分別移取各標準儲備液適量容量瓶中,用甲醇ξ 水溶液定容,配制
級混
合標準溶液,然後將該混◥合標準溶液逐級稀釋 2 倍、4 倍、8 倍、20 倍,得到五
級標準工作液。
3.2 樣品前處牙齒窟窿蠅蟹耶多頓時臉色大變理
1、提取
準確取
定◣質量樣品於 15 mL 離心管中,加入提取↘液 8 mL,浸泡過夜後震
蕩、離心後取上》清液,重復提取後合並上清液待凈化。
2、凈化
分別用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化和№平衡固相萃取小柱,然後取▃上述提取液htt
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3
過柱,用 15%甲醇水神器長劍飛落到了醉無情手中淋洗後用 5 mL 甲醇洗脫,並收ξ集洗脫液。將洗脫液氮吹至
近幹,用 1 mL 20%甲醇水溶液復♂溶,離心取上清液至棕色樣品瓶中,待上機。
3.3 儀器條件
1、液相色譜他條件ζ :
a. 色譜柱:BEH C18色譜柱(2.1×100 mm,1.8 μm)
b.
流動相:
溶劑A 0.1%甲酸水溶液
溶劑B 乙***
梯度洗脫 按下表所示線性『梯度洗脫
c.
流速 0.25 mL/min
d. 進樣量:5 μL
e.
柱溫:40℃;
流動相的梯度條件
時間(min) %A %B
0 90 10
3 75 25
3.5 20 80
7.5 20 80
8 90 10
10 90 10
2、質譜條件:
電噴霧〓電離源(ESI),正負離子電︽離模式。離子源溫度500 ℃, 離子源電
壓5500V
-
4500 V,氣簾氣30 psi,霧化〓氣和輔助氣均為50 psi。采用多反應監測
模式(MRM)進行掃描。用於←定量分析的離子對見下表2:
檢測物質 定量/定性離子 DP EP CE CXPhtt
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4
水楊酸(SA)
137.0/92.9
-
45
-
10
-
25
-
10
137.0/65.0
-
45
-
10
-
30
-
10
茉莉酸(JA)
209.1/59.1
-
50
-
10
-
20
-
10
209.1/165.0
-
50
-
10
-
20
-
10
脫落酸(ABA)
263.0/152.9
-
50
-
11
-
18
-
10
263.0/219.1
-
50
-
11
-
18
-
10
赤黴素3(GA3)
345.1/239.0
-
60
-
15
-
20
-
13
345.1/143.0
-
60
-
15
-
20
-
13
赤黴素7(GA7)
329.1/223.1
-
60
-
10
-
25
-
13
329.1/255.0
-
60
-
10
-
25
-
13
赤黴素4(GA4)
331.1/243.3
-
60
-
10
-
25
-
13
331.1/257.4
-
60
-
10
-
25
-
13
反玉米素(tZ)
220.1/136.0 60 10 22 10
220.1/202.1 60 10 18 10
反玉▅米素核苷(tZR)
352.2/220.1 60 10 25 10
352.2/136.0 60 10 32 10
吲哚乙酸(IAA) 176.0/130.0 60 10 18 10
吲哚丙酸(IPA)
190.0/130.0 80 10 20 13
190.0/172.0 80 10 13 13
4
-
***
-
吲哚乙酸
(4
-
Cl
-
IAA)
210.1/164.1 80 10 22 15
210.1/193.0 80 10 11 10
利波腺苷(2
-
iPA)
336.1/204.2 80 11 25 12
336.1/136.1 80 11 32 16
玉米素(cZ)
220.1/136.0 70 10 24 15
220.1/119.0 70 10 40 13
6
-
糠氨基嘌呤臉龐(6
-
KT)
216.0/81.0 70 10 25 12
216.0/148.1 70 10 20 13
吲哚丁酸(IBA)
204.0/186.1 100 10 18 13
204.0/130.1 100 10 30 13
N6
-
異戊烯基腺嘌呤
(2
-
iP)
204.0/136.0 70 10 20 11
204.0/119.0 70 10 40 13htt
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3.4 計算公式
將混合標準品溶液逐級稀釋╲成系列標準品溶液,以╱標準品濃度 x(ng/mL)為
橫坐標,以對照品峰面→積值 y 為縱坐標,繪制標準曲線,計算樣品中目標物含
量。
4 數據處理及方法驗證
所※有數據通過 AB Analyst 化學工作站進行處理。