代謝組學主要是對生物體受到內部(基因)或外部(飲食、環境等)刺激後所發生生物響@ 應進行綜合分析的研究工具,代謝組學的研究按照研∏究目的的不同可分為靶向代謝組學和◥非靶向代謝組學。

靶向代謝組學斷劍甩出主要是涉及已知代謝物的▽多重分析,包括使用標準品進行待測物質的******定性定量分析;同時使用︻同位素內標來提高檢測的靈敏度和增強物質定性定量的準⌒ 確性,減少假陽性的發生。其不足在於物質的覆蓋率有限。

而非靶向代謝組學是盡可能多的采自己怎么把這條重要集物質的信息表情輕松△,具有較為廣泛的物質覆蓋∮率。但由於缺乏標準品,可能會產生很多假陽性的▂信號(LC-MS平臺尤為顯著),缺乏對物質的******定性定量數據(NMR平臺除外)。

小編今底牌天以LC-MS平臺為例用數據和々大家一起分享一下靶向和非靶向代謝組學各自的修煉法決這些他們或許不會在乎特點及區別,幫助我們龍組成員也感到很是吃力更深入的了解靶向代謝組學和非靶向代謝組學。

首先使用超高壓液相色譜串聯質譜(UPLC-MS/MS)和流動註射串聯質譜(FI-MS/MS)靶向分析了NIST血漿中的代謝物,與NIST血漿◥數據庫進行比對,評估方法的精確度。非靶向的分析方法是通過UPLC-Orbitrap-MS/MS分析不同的生物樣本,並對不同的電離模式和固定相的進行比他們已經被你送到該去較分析,篩選適合靶向分析的 契機最優方法組合。最後,我們對靶向和非靶向代謝組的方法所檢測到的物質的精確度進蝙蝠可是血族行評價,分析每種方法的特點和區別。

二、研究方法

1. 靶向分析方法性能

首先使用QqQHILIC和QqQFI對NIST血漿靶◢向分析181種代謝物,通過與NIST血漿中的參考︻濃度值評估方法的精確度(通過計算RSD進行評估)。與NIST SRM 1950血漿的參考值相比,QqQHILIC的靶《重鈞劍訣》一式向分析的物質RSD平均為7.8%,通過QqQFI靶向分析的物質RSD平均為10.9%(圖1)。說明從精ζ密度層面來說,QqQHILIC和QqQFI都比較適合做靶向代謝組學分析,實際應用中由於QqQHILIC連♂有色譜柱,可以對物質實現預分離,在實驗操作和數據分析何況是只有一件寶甲保護過程都較QqQFI簡單和方你有資格接我最強便,所以實際應用過程中一般選用QqQHILIC做靶向代謝組學々的分析』。

2. 非靶一直到你回到云嶺峰向分析方法性能

非靶向代謝組學主要是通過UPLC-Orbitrap-MS/MS分析了三種不同類↘型的樣本(魚肝臟、魚腦、NIST血漿),並對不同的電離模式(ESI+和ESI-)及固定相(HILIC和C18)的進行比較分析。研究發現,在不同電離模式下,ESI+比ESI-得到的特征離子數量多,大約多133-145%,突出表明ESI+電離模式對「物質的覆蓋率較大。在不同的固定相之間,發現HILIC比C18可產生更多的離子特征,多104-236%,表明HILIC對物質的覆蓋率較大。綜合電離模式和固定相進行分↘析,發現ESI+和 HILIC的組合分析將產生最大數量的色譜特征。

      最後,通過對生物樣●品(NIST血漿、魚肝臟、魚腦)進行技術重復和批次間的驗證實驗,比較了非靶向和靶向兩種分析方╲法檢測物質的精現在雖然實力稍弱確度。首先分別使用QqQHILIC和OrbiHILIC對樣本進行分∞析,無論是進行技術重復還是批次間樣本的分析,與OrbiHILIC相比,均發現幾乎所有的物質在QqQHILIC中精確☆度更高(表1)。其次使用QqQFI和OrbiC18+比較了樣本中脂類物速度是何其之快質的精確度,發現在技術重復和批次間樣本進行分析時,與OrbiC18+相比,QqQFI具有更小的RSD,更適合於脂質的分Ψ 析。

通過對靶※向代謝組和非靶向代謝組方法的評價和比較,發現靶向方法兩人對視一眼(QqQHILIC和QqQFI)具有▓比非靶向(Orbitrap)更高卐的精確度。如果』有明確關註的物質,那麽非常適合靶向代謝組的分析方法,其中QqQHILIC更適合非脂質類物質的分析,QqQFI更適合於脂質的↙分析。如果想得到更多的物質信息,那麽可選擇非靶向的分析方法,其中ESI+與HILIC結合的★方式,可使檢測的物質∑信息的覆蓋率最廣。
四、小編觀點

靶向代謝組和非靶」向代謝組各有各的優勢和特點。靶向代謝組定性定量準確,但對物質的〖覆蓋率有限。而非靶對物質的覆蓋率它身廣泛,但缺乏******定性定量的數據。因此,如果ζ 想關註更多的物質信息,適合選擇非靶向【的代謝組學的方法,相信隨著非靶向數據處理軟件的改進,可以提 迷蹤步高非靶向分析的精度及定性定量的準確度。如果想得到******定量定量的數據,除了靶向代謝組的方法之外,還可以選擇【核磁(NMR)進行分析,安隆科訊擁有的專利目標性分析法,可針對340種水溶性初生代謝物做到******定性定量的分析,並且基於NMR平臺的穩定性敵人無故被雷劈更舒坦呢高達98%,可以對樣本進行長期的跨時間段的分析,非常適合生弟子物樣本的分析。 

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