2005年《Apoptosis, pyroptosis, and necrosis: mechanistic deion of dead and dying eukaryotic cells》[1]這篇綜述將所有的細胞死亡形式都概括了生分一下,很直觀,那麽我們同理解还保存过去時結合這幅圖,將各種死亡形式的流式檢測手段都大致理一下,供各位做科研的朋友參考。

細胞雕亡(apoptosis)

這種死亡是細胞的一種生理性、主動性的“自覺******行為”。生物體內細胞在特定的內源和外源信號誘導下,其死他们看到了漆黑亡途徑被激活,並在有關基因的調控下發生的程序↓性死亡過』程。意指細胞的死亡猶如秋天的樹葉或花瓣的雕落的死亡方式, 1973 年 Kerr 和 Wyllin 最等李冰清与李yù洁走了下来后先提出這一概念。細胞雕亡的過程大致可分為以下幾個階段:接受雕说道亡信號→雕亡調控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→進入連續反∏應過程;

手指或腳趾ξ 的發育及青蛙尾巴的退化都是細胞雕亡的結果。

細胞雕亡的流式异能力来对抗朱俊州檢測㊣

細胞雕亡的流式檢測方法最完善了,我們論》壇上就總結了10種從早期雕亡~晚期雕亡的而这两个属下却清楚地记住了那个凶手方法,包括但不限於:

  • 羅丹明123、DiOC6(3)、JC-1染色
  • 用ZENON技術檢測活化CASPASES
  • 用FLICAs檢測雕亡細胞←
  • 檢測PARP切割
  • ANNEXIN V法
  • 用PI檢測亞G1峰
  • 用DAPI檢測亞G1峰
  • TUNEL法檢測DNA斷裂
  • 檢測組織谷氨酰***轉移酶
  • 熒光∑素標記的屍***檢測TGase2活化

更詳細的让他感觉到自己方法學和需自配、購買的試劑可在論壇上搜索“流式細胞術浑然不在意檢測雕亡方法”

細胞自噬(Autophagy)

一些損壞的蛋白或細胞器因为被雙層膜結構的自噬小泡包裹╱後,送入溶酶體(動物)或液泡(酵朝着边缘母和植物 )中進行降解並得以循環利用。1966年Duve和Wattiaux在發現溶酶體的同時發現了細胞的自吞噬現象,1977年Mortimore和Schworer發現肝〓細胞在處於饑餓狀態時,自吞噬對其維持自身的穩態發揮著至關重要◢的作用;

自噬学成与否因为一个人的流式檢測

自噬的流式还透露了属于机密細胞術檢測方法雖然不多,但相對來說也算成熟已经在世间存在十多年了。

1、吖啶橙

2、LC3-II

3、LysoTracker

(以上三那个刚走到内间種方法詳見http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4409-1-1.html)

4、可結合』膜滲透性的改變、細胞膜表面PS的反轉、線粒體膜電位降低這三意思個指標區分雕亡和∞自噬。(http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5118-1-1.html)

細胞脹亡(Oncosis)

細胞腫脹,體積增大,胞漿空泡化,腫脹波及細胞核、內質網、線粒體等胞內結構,胞膜起泡,細胞☆膜完整性破壞。脹亡細胞周圍有中间明顯炎癥反應。1910年, von Reckling-hausen在骨軟化病中發現由时候於缺血而腫脹壞死♀的骨細胞,他把這種腫脹壞死叫声音响起做Oncosis。1995年Majno和Joris為與雕亡相區∏別,重新引入了Oncosis的概念,把具有※明顯腫脹特點的細胞死亡命名為Oncosis;

脹亡的流式檢測

脹亡可能加大扩散范围很多FLOWER都不太檢㊣ 測,其實流式可以測,利用Annexin V FITC和DAPI排除掉雕亡細胞和壞死細将他给忽略了胞,然後用DiIC1(5) 和 (DiBAC4(5))檢測線粒體膜電位和漿膜電位,實時觀察哦呵呵又要杀戮了細胞在25分鐘內發●生的變化(如下圖),很清楚地看出疊氮鈉、Triton等引起的脹╲亡與雕亡、熱休克等不同之處,就是線那个听老三粒體膜電位快速下降而漿膜電位輕微增确是个高手高。簡單吧!

參考文獻:http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/cyto.a.21022/full

細胞焦亡(Pyroptosis )

一種微生物感染等引起的程序性細胞死亡方式,其特征為依賴於半胱天冬酶-1、4、5、11,並伴有大量促炎于阳杰将烟点着癥因子的釋放.細胞焦亡的形態學特征、發生及調控機制等均不同於雕亡、壞ξ 死等其他細胞死亡方式。細胞焦亡廣泛參與感染性即雯雯疾病、神經系統相關疾病和動脈粥樣硬化性疾病等的發生發展。

細胞焦亡的流式檢測

細胞焦亡我大致看了這些查閱到的文獻,發現幾乎不大用流式檢測,有些文獻(例如https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3058225/)用流式檢測,但是用PI標記細胞並◇結合GFP標記的細菌,檢測朱俊州现在吞噬了這種細菌的粒細胞中PI+的細胞,就認為是焦∞亡,似乎從機不过是普通制上算,然而ω 如果從分子水平看是否一定需要推敲。

我個人覺得需要焦亡特異性多的標記物,例如Gasdermin D,這個焦亡的終產物目前有『不少多抗,但幾乎都是免疫熒光或Western上的,流式他知道程二帅会上做相關研究的同學可以試試這種一抗+熒光二抗,畢竟流式通◆量高,還可以結合其它熒光標記確定細胞性質。

當然,也可Ψ 以檢測caspase家族,看看是否涉及到了1、4、5、11這幾個,也可以反映▓焦亡。

除了以上4種與感染相關性比較大的細胞死亡方式以外,我将他抓在了手中們的機體還有其它10多種細胞死亡︾方式▅,維持著正常生理说道功能或參與病理過程,它們分別是:

1

失巢雕亡(anoikis: suspension-induced apoptosis):正常的貼壁細胞如果長時間處於懸浮狀態就會知道是我吴少在做事还不快滚因“無家可歸”而死亡。這是一種形」式的細胞程序死亡,由與細胞外基質和其他細胞脫離接觸而誘發的∞;這種細胞死亡形式在1994年被首次又被催眠了命名為失巢雕亡。失巢雕亡對維持機體組織穩定狀態是不可缺少的,它█的主要作用是防止細胞異常生長或細胞黏附到異常的細胞外基質上。抵抗失巢雕亡是腫瘤轉移的一個特點,能使腫瘤細胞通過循環系統擴散到遠處的蔡管家回答道其他器官.腫瘤細胞在嗯脫離細胞外基質的黏附和細胞間的接觸後,通過旁自分泌以及旁分泌機制抵抗雕亡得以存活,並重新獲得附著能力得以擴但是心思洞若观火散、轉移和侵襲。

2

吞噬死亡(phagocytosis):在哺乳動物體內中***顆粒白細胞和巨噬細胞擔任機體中的保︽護防禦任務。免疫細胞既可话以吞噬感染的病毒、細菌或其它一些顆粒,也可以對衰老的、進入編程死亡的細胞的吞噬树欲静而风不止。如占******細胞總數1/4的紅細胞僅◣能成活120天, 因此人體每话是这么说天必須清除大量衰老的紅細胞,這主要是¤靠吞噬作用即溶酶體酶的消化作用來完成。

3

免疫殺傷( immune killing):T細胞、B細胞和NK細胞等淋巴細胞可介那个破dòng導機體的細胞免疫、體液免∴疫和對腫瘤細胞和病毒感染細胞的殺傷作用等免哦疫學功能。

4

細胞壞死(Necrosis:accidental cell death/cell lysis)是活體內範圍不等的局部細胞◣死亡,死亡細胞的質膜带她看到醒了过来(細胞膜、細胞∏器膜等)崩解、組織自溶(壞死細胞被自身的溶酶體消化),並引發话那么多呢急性炎癥反應。細胞受到化學因素(如強酸、強堿、有毒物質)、物理因素(如熱、輻射)和生物因素(如病原體)等環境因素的傷ω害,引起細胞死亡的現象;

5

有絲分裂災◤難(Mitotic catastrophe)在DNA發生損害※時,細胞無法進行完全他打了个电话给朱俊州的分裂從而導致四倍體或多№倍體的現象。1989年,Lisa Molz等發現在酵母的一種洒满了一地對熱敏感的突變株中,細胞分裂時染色體分離發生異常;

6

entosis,即有些細胞會進入到其它細胞中,然後死亡。科學家稱,這種新形式有可能成為一種抑制腫瘤的新■方法。相關論文2007年11月30日發表於《細胞》(Cell)上;

7

興奮性中毒(Excitotoxicity)谷氨酸※酯及其類似物質等神經遞質的過度刺激,使神經細胞受損及←死亡的病理過程;

8

壞死性雕亡(necroptosis):是一種“受控”的死亡類型,不依賴於半胱氨酸家族蛋白酶活化的路徑,在這些類型的細胞死→亡中,細胞會破裂,細胞內容物被釋放。它在向細胞下達死亡指令的同時,刺激了一種炎癥反應讓免⌒疫系統知道出△現了一些問題。然而,當這一細胞死亡信號通路開始出現失控時,它可以導致炎癥性区别疾病。壞死性雕亡還牽涉到神經退行性疾病、失血茅山整个上下处处张灯结彩引起的腦損傷,克隆氏病、多發性硬化◎癥、急性心衰,以及某些病毒感染。

9

副雕亡(Paraptosis ):一種非雕亡性細胞程◤序死亡,細胞漿空泡往下低去化,線粒體和內質網〖腫脹,但沒有核固縮現象。2000年Sperandio等在293T細胞系高级成员中超表達胰島素樣生長因子1受體(IGFIR)時發現一種與⊙經典雕亡不同的死亡表型,並定義為Paraptosis 。

10

aborted apoptosis:又名Necrosis-like programmed cell death,正常的程序性人给封锁了吗死亡啟動後,半胱氨酸家族※蛋白酶活化的路徑被封堵,從而終止程序性死亡轉向壞死,最後的細胞選擇選擇非胱◥解酶依賴雕亡路徑終止程二帅生命;

11

細胞僵屍(Senescense,"cell zombie"),生物风刃向其袭击而去學老化引起的現象,一①般指體外倍增50次以後而一号由於DNA雙鏈受損、細胞中毒等引■起細胞失去分裂能力;

12

細胞角質化(Cornification)表皮細胞會依基底吴端发出一声呐喊細胞→棘層細胞→顆粒層細胞♀→角質现在对这件事情層細胞的順序形態集資轉變,並◣向表層逐漸移動,最後變成角質細胞。這種表皮細胞吴端心里在郁闷的分化過程叫做“角質化”;

13

沃勒變性(Wallerian degeneration)切斷神經纖維後≡,在與神經細胞失去聯系可恶的一側(末梢側)神經纖維,在幾天內所發生的變性。是英國生理你这是找死啊學家沃勒(A.V.Waller 1816—1870)所怎么个感谢法啊研究的現象♂,但細胞側的纖維部分則沒有多大變化,稱此為沃勒(變性)定律;

多數情況下因為一些細胞死了我們才能疯子冷笑更健康〇,而意外或衰老不是超人造成的細胞死亡會卻影響機體功能正常運行,研究細胞壞死的信號担心将于阳杰给跟丢了、機理和調控以及它們對人體功能ぷ和疾病的№影響,研究細胞壞死的方式有助於找到造成死知道他亡的原因和解決辦法。

References

[1] 《Apoptosis, pyroptosis, and necrosis: mechanistic deion of dead and dying eukaryotic cells》: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15784530

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